朱越雄（蘇州大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，215151）本文就江蘇省吳江市水產(chǎn)養(yǎng)殖中羅氏沼蝦苗細(xì)菌病控制的藥物定性和定量技術(shù)進(jìn)行了探討。蝦苗細(xì)菌病的診斷可借助于顯微觀察，將瀕死的蝦苗用無(wú)菌水反復(fù)沖洗體表后，用無(wú)菌吸水紙將體表所帶水分吸干。用無(wú)菌鑷子拉開頭胸部和腹部，分別涂片，并用結(jié)晶紫對(duì)涂片作簡(jiǎn)單染色后，鏡檢。感染細(xì)菌病的蝦苗組織涂片中可觀察到大量細(xì)菌，且細(xì)菌形態(tài)常一致。同時(shí)以水體凈度為，在發(fā)生細(xì)菌性疾病的育苗池水體中，氨氮量和有機(jī)物含量往往較高，這有利于化能異養(yǎng)菌的生長(zhǎng)，而水產(chǎn)動(dòng)物病原菌多屬此類。當(dāng)確診為細(xì)菌感染后，即可開展藥物的定性和定量試驗(yàn)，以避免濫用藥物和由于未及時(shí)控制病勢(shì)發(fā)展而貽誤時(shí)機(jī)。
1材料與方法2的肉霄蛋白胨瓊脂和含雞全血的瓊脂。藥物敏感性定性檢測(cè)用上海市衛(wèi)生防疫站生產(chǎn)的抗生素藥敏紙片，包括四環(huán)素、卡那霉素、紅霉素、頭孢拉定、吡哌酸、痢特靈、強(qiáng)力霉素、青霉素G、麥迪霉素、呋喃妥因、妥布霉素、復(fù)方新諾明。
藥敏紙片法具有快速定性的特點(diǎn)，且結(jié)果可靠。敏感藥物定量檢測(cè)選擇定性試驗(yàn)中對(duì)細(xì)菌具高敏感性且價(jià)格低廉的四環(huán)素和痢特靈。
病原細(xì)菌分離采用蝦苗組織涂布培養(yǎng)法，用鏡檢涂片相同的方法，分別涂布于肉膏蛋白胨瓊脂和含雞金血的瓊脂中，30 *C孵育16hi后，檢測(cè)血瓊脂中溶血現(xiàn)象，同時(shí)檢測(cè)肉膏蛋白胨瓊脂中的優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)菌。如無(wú)溶血現(xiàn)象，則尚需檢測(cè)肉膏蛋白胨瓊脂中優(yōu)勢(shì)菌的溶血性。本試驗(yàn)中因?yàn)闊o(wú)溶血現(xiàn)象發(fā)生，因此直接用優(yōu)勢(shì)菌進(jìn)一步劃平板純化后，擴(kuò)大培養(yǎng)作為菌種，用于藥物的定性和定量試驗(yàn)。
菌種在進(jìn)行藥敏試驗(yàn)前以肉湯蛋白胨液體培養(yǎng)12hr后，以每皿2004的量接種于平板，并用玻璃涂棒分別從三個(gè)方向涂布使均勻分布，置30C放置5min使平板表面干燥，然后每皿貼三片藥敏紙片，置30C孵育16hr，觀察并記錄抑菌圈直徑。
在五種對(duì)菌敏感的藥物中選擇四環(huán)素和痢特靈作為定量試驗(yàn)藥物，四環(huán)素在酸性溶液中具高溶解度，因此用pH3 0的PSS溶解后，再以pH6.0的PSS稀釋，痢特靈直接用蒸餾水溶解并稀釋，均配成2mg/ml濃度的原液。取試管若干并編號(hào)，按一定的規(guī)律加液體培養(yǎng)基其中第1管加1.9ml，其余每管1ml然后在第1管中加抗菌藥物原液0.與培養(yǎng)基混勻后吸出1ml至第2管中，同樣方法依次倍比稀釋藥物，至第9管，吸棄1ml.第10管不加藥物作為對(duì)照；后每管加入經(jīng)適當(dāng)稀釋的菌液0.05ml，混勻，置30C孵育16hr肉眼觀察結(jié)果，以菌液呈清亮狀態(tài)的試管中抗生素低含量為佳抗菌濃度。
2結(jié)果與分析定性試驗(yàn)中藥敏紙片法所得結(jié)果如表1.可見在12種抗生素中痢特靈和四環(huán)素抑表1定性試驗(yàn)中藥敏紙片的抑菌效果抗菌藥物抑菌圈直徑（mm）四環(huán)素卡那霉素紅霉素頭孢拉定吡哌酸痢特靈強(qiáng)力霉素青霉素G麥迪霉素呋喃妥因妥布霉素復(fù)方新諾明菌效果好，而青霉素G、麥迪霉素和復(fù)方新諾明對(duì)病原菌無(wú)抑制作用，即該菌對(duì)上述三種藥物具耐藥性。在痢特靈和四環(huán)素中可確定一種為定量試驗(yàn)藥物，但一般為提高生產(chǎn)應(yīng)用中的保險(xiǎn)系數(shù)，常采用二種藥物同時(shí)使用的方法。
四環(huán)素和痢特靈的定量試驗(yàn)結(jié)果見表2.其中四環(huán)素和痢特靈濃度分別達(dá)到50/ml和25/ml時(shí)，菌液呈清亮狀態(tài)，菌的生長(zhǎng)被完全抑制。而在四環(huán)素和痢特靈的濃度分別為25g/ml和125g/ml時(shí)，雖然細(xì)菌仍可生長(zhǎng)，但其生長(zhǎng)已受到明顯抑制。因此，在生產(chǎn)應(yīng)用中可選擇四環(huán)素用藥濃度在40~50g/ml，痢特靈用藥濃度在15~25Mg/ml之間。以上述選用濃度將兩種藥物同時(shí)使用可收到良好的防治效果。
表2四環(huán)素和痢特靈的定量試驗(yàn)結(jié)果試管號(hào)1抗生素含量（g/ml）1m四環(huán)素一液透明度痢特靈一一+注：一為清亮，+為微混池，++為較混濁，+++為很混濁。
湛江“海博會(huì)”緊鑼密鼓籌備南國(guó)港城歡迎八方賓客bookmark3湛江海洋經(jīng)濟(jì)博覽會(huì)，將于2000年11月25日至11月30日在美麗的南國(guó)港城湛江隆重舉行。
域辦公室、全國(guó)經(jīng)協(xié)組織聯(lián)合會(huì)、中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)、中國(guó)水產(chǎn)流通與加工協(xié)會(huì)、中國(guó)寶石協(xié)會(huì)等協(xié)辦。
戰(zhàn)略研討會(huì)；全國(guó)水產(chǎn)品暨水產(chǎn)新技術(shù)交易會(huì)；中國(guó)（湛江）珍珠節(jié)；海洋科技人才交流；濱海旅游招商推介；湛江海洋高新科技園招商；水產(chǎn)飼料推介；友好城市、港口合作；我國(guó)海洋大學(xué)聯(lián)合辦學(xué)；海洋沙灘排球賽等。屆時(shí)將邀請(qǐng)國(guó)家有關(guān)部門、廣東省有關(guān)部門、海洋水產(chǎn)科研機(jī)構(gòu)和大專院校、國(guó)內(nèi)外沿海城市涉海單位的和專家，以及國(guó)內(nèi)外參展企業(yè)、客商等5000多人出席
